ِDezAzma

گرد آورنده : مهرداد طاهرمرادی

رشته : علوم آزمایشگاهی

معرفی مولکول بصورت کلی

کلمات مترادف : CK ، CPK ، کراتین کیناز
توصیف : CPK یک آنزیم داخل سلولی است که غلظت آن در عضله اسکلتی ، میوکارد و مغز بالا است و آسیب به هریک از این بافتها باعث افزایش سطح سرمی CPK می شود . این آنزیم سه ایزوفرم دارد که هر یک منشا بافتی CPK سرم را مشخص میکند : MM (عضله اسکلتی ) ، MB ( میوکارد) و BB (مغز) .

در هر گرم از عضلات مخطط ، قلب و مغز به ترتیب 2000 ،600 و250 واحد از این آنزیم وجود دارد. سایر اندام ها مانند کلیه و شش مقدار کمتری از این آنزیم را دارا میباشند ، به طوریکه به ازاء هرگرم از این بافت ها به ترتیب 2 و12 واحد گزارش شده است .

سریعترین راه برای تجدیدATP در تارهای عضلانی واکنشی است که CPK آن را کاتالیز میکند :

جهت واکنش تا حد زیادی بستگی به pH اپتیمم آنزیم دارد . برای تبدیل کراتین به کراتین فسفات  pH اپتیمم برابر با ۹ و برعکس آن برابر ۷/۶  لازم است .

کراتین يك تري پپتيد است كه توسط سلول هاي كبدي توليد شده و به كمك جريان خون به عضلات منتقل ميشود و در آن جا در حضور ATP و آنزيم كراتين كيناز به كراتين فسفات كه تركيب پرانرژ‍ي و شكل ذخيره انرژي شيميايي در عضلات است، تبديل مي شود. در pH خنثی قدرت فسفریله کردن کراتین فسفات بیشتر ازATP است و این امر موجب تولید ATP در سلولها میشود. وجود یون منیزیم به مقدار کم، جهت انجام واکنش ضروری است. یونهای مس، نقره، جیوه و موادی مانند سیترات سدیم، EDTA و مقادیر زیاد یون منیزیم اثرات مهارکنندگی برروی فعالیت آنزیم دارند.

ساختار شیمیایی

کراتین کیناز یک دیمر با وزن مولکولی 5000 دالتون است که از 3 ایزوآنزیم اصلی( MM،MB،(BB که هریک متشکل ازدو زنجیره پلی پپتیدی می باشد.

در آزمايش الكتروفورز BB سريع ترين حركت را به سمت قطب آند دارد و به همين جهت آن را CPK₁ و MB كندتر از BB‌به طرف آند حركت مي كند و آن را CPK₂  و سرانجام MM كه كندترين حركت خود را نشان مي دهد و در ناحیه گاماگلبولین پروتئین های سرم متمرکز می شود، CPK₃  ناميدند.

ایزوزیم BB بطور طبیعی در پلاسما موجود نیست ، فعالیت ایزوآنزیم MB در پلاسما دلیل بر وقوع انفارکتوس میوکارد است. در حالیکه ایزوزیم MM به مقدار زیاد در تباهی سلولهای عضلانی در پلاسما وارد می شود. در این مورد آنزیم آلدولاز که بنام فروکتوز ۱ و ۶- دی فسفات آلدولاز نامیده می شود نیز افزایش می یابد.

نقش بیوشیمیایی در سلولهای طبیعی یا تومورها

CPK به مقدار فراوان در قلب ، عضلات و در مغز وجود دارد و به شکل دیمر می باشد و از دو نوع پلی پپتید بنامهای B, M و یا مخلوطی از این دو تشکیل شده است و بنابراین سه نوع ایزوآنزیم بوجود می آید که بنامهای MM, MB, BB نامیده می شود

نوع BB این آنزیم در بافت مغز و همچنین در بافت های عصبی تیروئید، کلیه ، ریه و امعاء

نوع MB در عضله قلب و دیافراگم به میزان 25-35%  و در عضلات مخطط به میزان 1%

نوع MM در عضلات مخطط به میزان 98% و در عضله قلبی به میزان 70% و همچنین در استخوانها موجود می باشند.

اين سه ايزوآنزیم، در سيتوزول مي باشند و به ايزوآنزیم هاي سيتوليتيكي معروف هستند. علاوه بر اين سه ايزوآنزیم،وجود دوايزوآنزيم كراتين كيناز macro(ubiquitous) و فرم micro(sarcomeric) از طريق روش الكتروفورز به اثبات رسيده است. فرم macro در همه جا به غير از بافت عضله و بين MM‌ و MB ظاهر مي شود و فرم micro در قسمت ساكومريك عضله موجود است. فرم _umt به سطح خارجي غشاي داخلي ميتوكندريهاي عضلات، مغز و كبد متصل است.اين ايزوآنزيم به صورت ديمر بوده و وزن مولكولي آن حدودD 350000 ميباشد. هردو ايزوآنزيم MوB قادرند به ايمنوگلوبولينها متصل شده و كمپلكس macro را تشكيل دهند.

در افراد سالم تقریبا بیش از 95% CPK توتال سرم را CPK-MM تشکیل می دهد. افزایش فعالیت CK پلاسما می تواند ترکیبی از این سه ایزو آنزیم باشد که بیشترین مقدار را CPK-MM تشکیل می دهد . علت پایین بودن غلظت MBو فقدان BB در سرم ، کم بودن میزان آن در بافت قلبی و مغز و کوتاه بودن نیمه عمر MBو BB درمقایسه با MM است . همچنین BB قادر نیست از سد رگ های خونی- مغزی عبور کند

در جریان خون آنزیم های پروتئولیتیک  MM را به MM )­­­­₁ وMM₂ (و MB را به) MB₁ وMB₂ ( هیرولیز می کند.

4. ارزش تشخیصی و بیماریهای مربوطه

CPK سرم (منظور (CPK-MM زمانی افزایش می یابد که صدمه ای به سلولهای عضلانی وارد شود . این آنزیم معمولا شش ساعت بعد از ضایعه افزایش می یابد. اگر ضایعه بافتی خیلی جدی نباشد سطح آنزیم 18 ساعت بعد به پیک خود می رسد و 2 تا 3 روز بعد به سطح نرمال خود بر می گردد. برای تشخیص انفارکتوس میوکارد کراتین فسفوکیناز توتال به قدر کافی اختصاصی نیست ولی مقادیر طبیعی آن ارزش بالائی در رد انفارکتوس میوکارد دارد. برای تشخیص انفارکتوس میوکارد از تستهای اختصاصی تری مانند CPK-MB و یا تروپونین قلبی I استفاده می شود.

ایزو آنزیم CPK-MB مختص سلولهای میوکارد باشد.سطح CPK-MB سه تا شش ساعت پس از انفارکتوس افزایش می یابد. اگر ضایعه جدیدی برای میوکارد ایجاد نشود سطح CPK-MB دوازده تا بیست و چهار ساعت بعد به پیک خود رسیده و 12 تا 48 ساعت بعد از انفارکتوس به حد نرمال بر می گردد.احتمالا در بیماران مبتلا به آنژین نا پایدار – شوک – هایپر ترمی بدخیم – میوپاتیها یا میوکاردیت سطح CPK-MB افزایش می یابد. همچنین مقادیر بسیار ناچیز CPK-MB در عضله اسکلتی یافت می شود بطوریکه آسیب شدید عضلات اسکلتی می تواند سطح CPK-MB را به بالاتر از حد نرمال افزایش دهد.
سطح ایزو آنزیم CPK-MB جهت تعیین وسعت و نیز زمان شروع انفارکتوس میوکارد مفید است. به دلیل تجویز مکرر ترومبولیتیک تراپی در انفارکتوس میوکارد – ایزو آنزیم CPK-MB اغلب جهت تعیین مفید بودن یا نبودن این نوع درمان به کار میرود. اگر سطح این ایزو آنزیم همچنان بالا باشد نشانگر اینستکه اخیرا یک انفارکتوس وسیع و قابل توجه ایجاد شده است بطوریکه اثرات مفید ترومبولیتیک تراپی ظاهر نشده است.
بهر حال کراتین فسفو کیناز عمده آنزیم قلبی در مبتلایان به بیماری قلبی است. از آنجائیکه کلیرانس و متابولیسم آن به خوبی شناخته شده است لذا سنجش آن در هنگام مراجعه 12 ساعت و 24 ساعت بعد

می تواند به دقت زمان،کمیت و بهبودی انفارکتوس میوکارد را نشان دهد.

موارد افزایش CPK :

افزايش سطح CPK تام: بيماري ها يا آسيب هاي وارده بر عضله قلبي، عضله اسكلتي و سیستم عصبی

افزايش سطح CK-BB : آسيب مغزي، سرطان مغز، سكته مغزي، خونريزي زير عنکبوتیه ، تشنج، شوك ، سندرم ري، كارسينوماي پستان و ريه، انفاركتوس ريوي

افزايش سطح CK-MB : جراحي آنوريسم قلبي، دفيبربلاسيون قلبي، التهاب عضله قلب، آريتمي هاي بطني، ایسكمي قلبي

افزايش سطح CK-MM: رابدوميلوز، ديستروفي عضلاني ، ميوزيت، جراحي، الكتروميوگرافي، تزريقات داخل عضلانی (IM)، له شدگي بافتي، توهمات روحي، هيپرتروفي بدخيم، هيپوكالمي، هيپوتيروئيدي

موارد کاهش CPK : آنهایی که توده عضلانی کمی دارند ، آرتريت روماتوئيد، درماتومیوزیت و پلی میوزیت شدید ، بیماریهای کبدی ناشی از الکل ، ماههای اول حاملگی ، هيپرتيروئيديسم، بيماري كوشينگ، بيماري هاي بافت همبند، توده هاي متاستاز داده به كبد، بيماران با عفونت يا سپتيسمي بستري در I.C.U .

عوامل مداخله گر:

افزایش دهنده ها: تزريق عضلاني، ورزش شديد، اعمال جراحي، افزايش BMI  و داروهایی از قبیل آمفوتريپسين B ، آمپي سيلين، برخي داروهاي بيهوشي، داروهاي ضد انعقاد ، آسپرين، كلوفيبرات، دگزامتازون، فوروزمايد، كاپتوپريل، كلشي ستين، الكل، لواستانين، ليتيم، ليدوكائين، پروپرانولول، سوكسينيل كولين، مورفين، هروئين، كدئين، پريگوگين ، ايميپرامين، ميوپرين، فنوباربيتال

توضیحات:

 حداقل يك ساعت پس از تزريق عضلاني نمونه گيري نكنيد.

 فعالیت های شدید جسمی و یا تزریق عضلانی ممکن است منجر به بالا رفتن  گذرا CPK  شود.

5. روشهای اندازه گیری

آنالیز CPK به دو صورت می تواند صورت گیرد که یا بخشی از یک مجموعه تست های شیمیایی می باشد یا اینکه جداگانه اندازه گیری شود. بطور مثال محصول واکنشی ADP را می توان در واکنش آنزیمی پیروات کیناز که در آن محصول واکنش «پیروات» آزاد می گردد وارد نمود پیروات خود نیز قادرست به کمک آنزیم لاکتات دی هیدروژناز LDH به لاکتات تبدیل گردد در این واکنش کوآنزیم NADH به NAD⁺ تبدیل می گردد و از طریق تغییر جذب نوری در ۳۴۰ نانومتر که طول موج مناسب برای اندازه گیری NADH است فعالیت آنزیم کراتین کیناز اندازه گیری می شود.

براي تعيين فعاليت آنزيم كراتين كيناز روش هاي adp and gilarye،nutall، oliver،hughes‌ مطرح شده است.

روش  Hughes:

متداولترين روش میباشد. در اين روش رنگ حاصل از تركيب كراتين آلفانتول و دي استيل كراتين كيناز را اندازه گيري ميكنند. اين واكنش با محلول پاراهيدروكسي بنزئات متوقف ميشود. در مقايسه با استاندارد در طول موج 540 nm 500 -اندازه گيري كرد. ميزان فعاليت طبيعي آنزيم در سرم بر حسب siqwa u/ml از 12-0 ميباشد كه مرز بيماري((border line 20-12 و در موقع بيماري بالاتر از 20 ميباشد.

روش فروکتوز 6 فسفات:

2ml از محلولCPK در یک لوله ریخته،50ml سرم به آن اضافه کرده و مخلوط کنید. سپس به مدت 3 دقیقه در بن ماری 37⁰C قرار دهید . سپس جذب نوری آن را در طول موج 340nm به دست آورید و در فواصل یک دقیقه،3 بار دیگر جذب نوری به دست آورید.

داروها و تداخل تست CPK :

مصرف داروها و مواد مخدر بخصوصي از جمله آمفوتريسينB،آمپي سيلين، برخي از بي حس كننده ها، ضد انعقادها، آسپرين، دگزامتازون(دكارون)، فورزمايد(لازيكس)، مورفين، الكل، كوكائين، كاپتوپريل، كولشيسين، لواستاتين، ليتيوم، ليدوكائين، پروپرانول، سوكسينيل كولين ميتوانند در تداخل تست آزمايشگاهي و افزايش كاذب سطح CPK ‌موثر باشند. همچنين فعاليت سنگين و جراحيهاي اخير مكن است موجب افزايش سطح ايزوآنزيم ها شوند.

ملاحظات نمونه گیری:

1. 1. تزريق IM موجب افزايش سطح ‍CPK مي شود.
2. 2. از هموليز نمونه اجتناب شود.
3. 3. در صورت تزريق IM بيمار زمان آن در برگه آزمايش ثبت شود.
4. 4. در صورت امكان مصرف هرگونه داروي مؤثر بر نتايج آزمايش قطع شود.
5. 5. سن و جنس بیمار در برگه آزمایش یادداشت گردد.

موارد عدم پذیرش نمونه : هموليز شدید موجب رد نمونه مي شود.

شرایط نگهداری : نمونه بايد فوراً مورد آزمايش قرار گيرد زيرا فعاليت CPK به طور واضحي پس از2  ساعت در دماي اتاق كاهش مي يابد. در دماي C^◦ 4 به مدت 7 روز  و در دماي C^◦-20  به مدت 28 روز پایدار است.

مقادیر طبیعی در سرم یا ادرار

محدوده نرمال برای CPK وابسته به روش است ولی بطور معمول بصورت زیر است:
مقادیر طبیعی: واحد (SI)

نوزادان: 68 – 580 U/L

کودکان و نوجوانان پسر (تا 17 سالگی) :  94 – 499 U/L

کودکان و نوجوانان دختر (تا 17 سالگی): 91 – 391 U/L

جوانان و بزرگسالان مرد (18 سال و بالاتر): 52 – 336 U/L

جوانان و بزرگسالان زن (18 سال و بالاتر):    38 – 176 U/L

منابع:

• بیوشیمی بالینی هنری دیویدسون2007/ریچارد مک فرسون/سالار بختیاری-جواد محمد نژاد اروق/انتشارات اندشه رفیع/اول/1386
• راهنمای سریع روش های تشخیص آزمایشگاهی PAGANA-PAGANA /امیر قادی پاشا-داوود لکستانی-سام زراعتیان/انتشارات برای فردا/1380
• بيوشيمي عمومي شهبازي-ملك نيا/دكتر پرويز شهبازي-دكتر ناصر ملك نيا/موسسه انتشارات وچاپ دانشگاه تهران/ج2/چاپ18/پاييز 1379
• اصول نظري وعملي آزمايشگاه بيوشيمي / سيده زهرا بطحايي٬ نعمت الله رزمي٬ محمود خياطيان/انتشارات دبيزش/چاپ اول/زمستان1378
• مرجع كامل تست هاي تشخيصي وآزمايشگاهي پاگانا/كتلين دسكا پاگانا٬ تيموتي جيمزپاگانا/دكتر رامين خدام٬ ناصر نژادي ٬سيدرضاموسوي/ انتشارات خسروي با همكاري نشر ديباج /چاپ اول/1386
• مجموعه سوالات كنكور كارشناسي ارشد بيوشيمي/ گروه مولفين/انتشارات كتابخانه فرهنگ/چاپ اول/1386

سامان نصیری                                                          

خلاصه تحقیق و معرفی کراتین کیناز:

کراتین کیناز یک آنزیم دیمر است که از 3 ایزوآنزیم اصلی( MM،MB،(BB که هریک متشکل ازدو زنجیره پلی پپتیدی می باشد، تشکیل شده است. نوع BB این آنزیم در بافت مغز وجود دارد.نوع MB در عضله قلب (میوکارد).و نوع MM در عضلات اسکلتی دیده می شود.اين سه ايزوآنزیم، در سيتوزول مي باشند و به ايزوآنزیم هاي سيتوليتيكي معروف هستند. در آزمايش الكتروفورز CPK-BB سريع ترين حركت را به سمت قطب آند دارد و به همين جهت آن را CPK₁و MB كندتر از BB‌به طرف آند حركت مي كند و آن را CPK₂ وسرانجامMM كه كندترين حركت خود را نشان مي دهد و در ناحیه گاماگلبولین پروتئین های سرم متمرکز می شود، CPK­­₃ ناميدند. بیشاز 95% CPK توتال سرم را CPK-MM تشکیل می دهد.. علت پایین بودن غلظت MBو فقدان BB در سرم ،کمبودنمیزانآندربافتقلبیومغزوکوتاهبودننیمهعمرMBو BB درمقایسه با MM است .

آنزیم کراتین فسفات کیناز در مواقعی که عضله نیاز به انرژی زیاد دارد با تبدیل کراتین فسفات به کراتین این انرژی را برای عضلات فراهم می آورد و نیز در حالت استراحت انرژی را به فرم کراتین فسفات ذخیره می کند.به صورت واکنش ADP+crP→cr+ATP

برای اندازه گیری فعالیت cpkروش های وجود دارد که شامل فتو متریک و فلورومتریک و متصل به آنزیم است که از واکنش رو به جلو cr→crP و معکوسcrP→crاستفاده می شود که روش معکوس سریعتر است و در ادامه مقاله با شکل و به تفصیل توضیح خواهم داد.

کراتین کیناز :

کراتین کیناز یک آنزیم دیمری (Kda 82) است که فسفریلاسیون برگشت پذیر کراتین (Cr) توسط آدنوزین تری فسفات (ATP)را کاتالیز می کند.

از لحاظ فیزیولوژیک ، هنگامی که عضله منقبض می شود، ATP به آدنوزین دی فسفات (ADP) تبدیل می شود ، و CK با استفاده از کراتین فسفات ( CrP) به عنوان مخزن فسفریلاسیون ، فسفریلاسیون مجدد ADP به ATP را کاتالیز می کند.

PHمطلوب برای واکنش رو به جلو (Cr+ATPÒADP+CrP) و واکنش معکوس (CrP+ADP¬Cr+ATP) به ترتیب ، 9و7/6 است. Mg²⁺یک یون فعال کننده اجباری می باشد که با ATP و ADP تشکیل کمپلکس می دهد. محدوده غلظت مطلوب برای Mg²⁺ کاملاً باریک بوده و افزایش Mg²⁺ نقش مهار کننده دارد.

اهمیت بالینی :

فعالیت CK سرم در تمام انواع دیستروفی عضلانی بسیار افزایش می یابد.در دیستروفی عضلانی پیشرونده ( به ویژه دیستروفی عضلانی ووابسته به جنس Duchenne) فعالیت این آنزیم در سرم شیرخواران و کودکان (7تا10 ساله ) بیشترین مقدار خود را دارد وممکن است مدت ها قبل ازظهر بالینی بیماری افزایش یابد.فعالیت CK سرم به طور مشخص با افزایش سن بیمار و کاهش توده کارآمد عضلانی با پیشرفت بیماری کاهش می یابد.در حدوداً 50 % تا 80 % از زنان ناقل ببدون علامت دیستروفی Duchenne فعالیت CK سه تا شش برابر افزایش می یابد.مقادیر بسیار زیاد CK در میوزیت ویروسی،پلی میوزیت و بیماری های عضلانی مشابه،چشمگیر است.با این وجود در بیماری عضلانی نوروژنیک نظیر میاستنی گراویس،موتیپل اسکلروزیس، فلج اطفال ،و پارکینسونیسم فعالیت سرمی این آنزیم طبیعی است.فعالیت بسیار زیاد آن همچنین در هیپرترمی بدخیم دیده می شود؛این بیماری،یک اختلال خانوادگی است که با تب بالا مشخص می گردد و با تجویز ماده بیهوشی استنشاقی(معمولاً هالوتان)به فرد مبتلا،بروز می کند.

ورزش و ترومای عضلانی CK سرم را افزایش می دهد.برای مثال،ورزش طولانی مدت،نظیر دوی استقامت،محتوای CK-MBعضله اسکلتی را به دلیل پدیده«بازگشت به دوران جنینی»[1] افزایش می دهد؛در این پدیده ،الگوی جنینی سنتز پروتئین مجدداً ظاهر می شوند.بدین ترتیب،ایزوآنزیم CK-MB سرم ممکن است در چنین شرایطی افزایش یابد.این توجیه همچنین ممکن است مسئول افزایش مقدار CK-MB باشد که گاهی از اوقات در نارسایی مزمن کلیوی(میوپاتی اورمیک)مشاهده می گردد.

بیماری های قلبی نظیر:جراحی bypass عروق کرونر،پیوند قلب،میوکاردیت،آمبولی ریوی،CK و CK-MB سرم را افزایش می دهند.برای تشخیص سکته قلبی حاد،امروزه از تست های غیرآنزیمی اختصاصی ترینظیر تروپونین قلبی I یا T بهره می برند.

فعالیت CK سرم با فعالیت تیروئید رابطه معکوس دارد.در قریب به 60 % از افراد هیپوتیروئید،مقدار متوسط افزایش فعالیت CK پنج برابر بیش از حد فوقانی مرجع است.ایزوآنزیم اصلی در اینجا CK-MMاست که حاکی از درگیری عضلانی می باشد.در طول زایمان طبیعی، فعالیت CK سرم در زایمان سزارین،بیشتر افزایش می یابد. CK-BB می تواند در نوزادان(به ویژه آن هایی که دچار آسیب مغزی شده اند یا وزن هنگام تولد آن ها بسیار پایین است بالا برود.با این حال،وجود CK-BB در خون (معمولاً با غلظت های کم)نمایانگر یک یافته طبیعی در اولین روزهای حیات است.

اندازه گیری فعالیت CK:

روش های متعدد(1)فتومتریک،(2) فلورومتریک، و (3) متصل به آنزیم،برای سنجش فعالیت CK بوجود   آمده اند،که در آن ها از واکنش رو به جلو (Cr!CrP ) استفاده می شود.از نظر آنالیتیک،واکنش معکوس ترجیح داده می شود زیرا 6 برابر سریع تر از واکنش رو به جلو پیش می رود.

Ck،تبدیل CrP به Cr را با فسفر یلاسیون همزمان ADP به ATPکاتالیز می کند.ATPتولید شده،توسط واکنش های جفت شده با آنزیم هگزوکنیاز(HK)/گلوکز -6- فسفات دهیدروژناز(G6PD)اندازه گیری می شود که در نهایت،NADP را به NADPH تبدیل می کند،که این نیز یه صورت اسپکتروفتومتریک پایش می شود.Szasz و همکارانش با اضافه نمودن مواد زیر،این سنجش را بهینه کردند:(1)N -استیل سیستئین برای فعال کردن CK،(2)EDTA برای اتصال به Ca²⁺ و برای افزایش پایداری مخلوط واکنش،(3)آدنوزین پنتافسفات ((AP₅A ،علاوه بر AMP برای مهار آدنیلات کیناز(AK).یک روش مرجع بر اساس تجربه قبلی،توسط فدراسیون بین المللی شیمی بالینی و پزشکی آزمایشگاهی [2] (IFCC)پدید آمد:این روش به منظور ایجاد یک روش مرجع برای اندازه گیری CK در دمای C37 اصلاح گردید.

فعالیت CK در سرم نسبتاً پایدار است و در طول نگهداری نمونه سریعاً از بین می رود.پایداری متوسط این آنزیم در دمای اتاق،کمتر از 8 ساعت،در دمای C4 به مدت 48 ساعت،و در دمای C20 – به مدت یک ماه است.بنابراین،اگر قرار نیست که سرم بلافاصله آنالیز شود،نمونه سرمی را باید در دمای C4 نگهداری کرد.همولیز مختصر،را می توان نا دیده گرفت زیرا گلبول های قرمز هیچگونه فعالیت CK ندارند.با این وجود،نمونه هایی که شدیداً همولیز شده اند،نا مطلوب هستند زیرا آنزیم ها و واسطه های آزاد شده از گلبول های قرمز(G6PD,ATP,AK)ممکن است بر روی فاز تأخبری اثر کنند و واکنش های جانبی در سنجش رخ بدهد.

فعالیت CK سرم در معرض تعدادی از گوناگونی های فیزیولوژیک از جمله(1)جنسیت،(2) سن،(3) توده عضلانی،(4) فعالیت جسمی،و (5)نژاد قرار می گیرد.برای مثال،مقدار فعالیت CK در مردان بشتر از زنان بوده و در سیاهپوستان بیشتر از غیر سیاهپوستان است.در نژاد هند و اروپایی،محدوده مرجع،هنگامی که CK با یک سنجش قابل رد یابی با روش مرجع IFCC در دمای C 37 اندازه گیری شود،در مردان،L/U 171-46 و در زنان U\L 145-34 است.

اندازه گیری ایزوآنزیم های CK:

روش های الکتروفورزی برای جداسازی کل الگوی ایزوآنزیم های CKمفید هستند.نوارهای ایزوآنزیم را می توان با انکوباسیون صفحه الکتروفورز با یک مخلوط سنجشی CK غلیظ شده،با استفاده از واکنش معکوس رؤیت کرد.NADPH تشکیل شده در این واکنش،سپس با مشاهده فلوئورسانس سفید مایل به آبی پس از برانگیختگی نور ماورای بنفش(mm360)آشکار می شود.NADPH را می توان با آن به وسیله دانسیتومتری فلوئورسنت به صورت کمی تعیین کرد؛این روش قادر است نوارهای U/L 5-2 را شناسایی کند.نمونه های شاخص نتایج بدست آمده از این تکنیک بر روی نمونه سرم یک فرد سالم و بیماری که 24 ساعت قبل از انجام آزمایش دچار سکته قلبی شده است در شکل A 2-4 نشان داه شده است.قدرت تفکیک الکتروفورز،همچنین می تواند نوارهای غیر عادی CK را که بسیاری از آن ها در شکل B2-4 نشان داده شده اند،آشکار سازد.

روش های ایمونو شیمیایی نیز در تشخیص ایزو آنزیم های cpkموثر می باشد.

در بخش اندازه گیری فعالیت cpkگفتیم :مقدار طبیعی cpkدر مردان u∕L 171-46 و در زنان u∕L145-35 می باشد که برخی بیماری های مرتبط با افزایش و کاهش را ذکر کردم:

موارد افزایش CK : درا کثر بیماران مبتلا به پلی میوزیت و درماتومیوزیت سطوح بالای CK وجود دارد.میوپاتی ناشی از الکل، هیپوتیروئیدی ، سندرم هایپرترمی بدخیم، دیستروفی عضلانی دوشن ، تشنج، سندرم میالژی ائوزینوفیلی ، ماههای آخر حاملگی ، همولیز متوسط تا شدید ، مصرف کوکائین ، رابدومیولیز، حوادث عروق مغزی ، آسیبهای میوکارد، کاردیوورژن، (شوک قلبی) ، تزریقات داخل عضلانی، نیز ورزش های شدید می تواننند باعث افزایش سطح CK شوند

موارد کاهش CK:آنهایی که توده عضلانی کمی دارند ، درماتومیوزیت و پلی میوزیت شدید ، بیماریهای کبدی ناشی از الکل ، ماههای اول حاملگی ( هفته 20) و آرتریت روماتوئید.

منابع و مآخذ:

1-اصول بیوشیمی بالینی تیتز.جلد اول،آنالیت ها و پاتوفیزیولوژی.فصل4

2-بیوشیمی مصور هارپر،دکتر پروین پاسالار .بخش یک،فصول 7و8و9و10

3-سایت های معتبر اینترنت (برای مقایسه ی مطالب)